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Antes de los experimentos, las células se transfirieron en MRS / MRSf reciente para LAB y FLAB, respectivamente, y se cultivaron durante la noche a 30ºC. Su incorporación al organismo es posible mediante el consumo de alimentos; el pescado y las verduras son las principales fuentes de Se. La cantidad de Se ingesta a nivel mundial depende de la cantidad presente en el suelo de cada país y la capacidad de las hortalizas para acumular Se, el tipo de cultivo cultivado y consumido, Se especiación, pH del suelo, contenido de materia orgánica, etc. En la naturaleza, el Se se encuentra como seleniuro (Se2−), como Se elemental y como las sales solubles selenito (SeO32-) y selenato (SeO42-), que son las formas más tóxicas. Estos resultados son importantes para el almacenamiento de granos de kéfir durante amplios períodos de tiempo y respaldan su transporte sin refrigeración. El proceso de reactivación es una etapa importante para asegurar un transporte adecuado y por tanto maximizar su uso industrial.
Acumulación intracelular de Se determinada por Icp
Teniendo en cuenta los pesos de los sedimentos celulares, las cepas ensayadas acumularon entre 126 y 580 µg Se / g de células; la mayor cantidad correspondió a F. tropaeoli CRL 2034 mientras que la menor correspondió a Lb. El contenido de Se restante en los sobrenadantes libres de células fue mayor en las muestras de Lb. Mientras que las dos muestras de enterococos mostraron valores similares, las de las dos cepas de W. cibaria mostraron un comportamiento dependiente de la cepa. Estudiamos el comportamiento de crecimiento de noventa y seis cepas BAL de origen floral y frutal pertenecientes a 6 géneros y 21 especies diferentes en MRS o MRSf en ausencia o presencia de 5 ppm de Se. Todas las cepas fueron capaces de crecer en presencia de Se a la concentración evaluada, aunque se observaron diferentes comportamientos de crecimiento dependiendo de las cepas ensayadas.
- Por otro lado, no hubo diferencias significativas entre la leche fermentada con granos de kéfir frescos y liofilizados.
- Cabe destacar que SeCys (la forma de Se más biodisponible) fue el único aminoácido Se encontrado en las células LAB analizadas en este trabajo.
- La leche fermentada con granos liofilizados muestra una muy buena aceptación.
tropaeoli CRL 2034, fueron seleccionados para experimentos adicionales debido a su capacidad para crecer en presencia de Se y reducir más del 80% del selenito agregado en el medio de cultivo. Las cepas crecieron de manera similar (8,5 a 9,1 log UFC / ml) y podrían acumular intracelularmente entre 1,2 y 2,5 ppm de Se después de 24 h de incubación, como lo reveló ICP-MS.
rhamnosus CRL 2031, que mostró un efecto deletéreo (alteración superior al 50%) en al menos uno de los parámetros de crecimiento evaluados. Las células se cultivaron en MRS o MRSf a 30 ° C durante 24 h en ausencia o presencia de 5 ppm de Se y luego se centrifugaron a 4.600 xg durante 5 min. Para ello, los sobrenadantes y sedimentos celulares bacterianos (0,1 g obtenidos de 10 ml de cultivo) se sometieron a digestión ácida en un horno microondas de 1000 W utilizando recipientes cerrados que contenían 1 ml de HNO3 concentrado y 0,5 ml de 30% (v / v). Las soluciones resultantes se enfriaron, se diluyeron hasta un volumen final de 25 ml con agua MilliQ y se analizaron para determinar la concentración de Se con una celda de reacción / colisión Agilent 7700 ICP-MS. Se empleó gas hidrógeno como gas de colisión para la determinación de Se.
La presencia de Se no afectó significativamente el crecimiento de 41 cepas, que incluían las pertenecientes a la especie Weissella minor, Leuc. Del total, los parámetros de crecimiento plantillas de excel de solo 10 cepas se vieron afectados significativamente en presencia de Se, entre las cuales las cuatro Ec. Las cepas más afectadas negativamente por Se fueron Lc.
Las condiciones operativas óptimas se incluyen en la Tabla 1. Se realizó en paralelo un grupo de control de cada especie bacteriana no expuesta al Se. Se realizaron tres réplicas independientes; la mezcla de reacción sin la adición de sedimentos celulares se utilizó como plantillas de excel blanco y se consideró en los resultados finales. Los cultivos se almacenaron a -20 ° C en caldo MRS con glicerol al 20% (v / v). MRS se complementó con un 2% (p / v) de fructosa para las especies fructófilas (es decir, las que pertenecen al género Fructobacillus).
