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¿Cuánto alcohol contiene el kéfir de agua?
El procesamiento en gel y la secuenciación de la banda de ADN se realizaron como se describió anteriormente. La identificación de las secuencias de bandas de ADN se realizó como se describió anteriormente. Para enumerar los microorganismos en el licor de kéfir de agua, se usó el licor de kéfir de agua obtenido como se describió anteriormente para preparar diluciones decimales apropiadas en solución salina estéril. Para el recuento de los microorganismos en los granos de kéfir de agua, se introdujeron 5,0 g de granos de kéfir de agua lavados obtenidos como se describe anteriormente en una bolsa de plástico estéril para el estomago.
El ADN purificado se diluyó hasta aproximadamente 50 ng μl − 1 antes de realizar los ensayos de PCR. Para evaluar la diversidad bacteriana, se utilizó el par de cebadores de ARNr 16S universales 357f-GC y 518r. El par de cebadores específicos de grupo LAC1 y LAC2-GC se usó para bacterias del ácido láctico, y el par de cebadores específicos de género bif164f y bif662r-GC se usó para bifidobacterias. La diversidad de levaduras se evaluó con el par de cebadores eucariotas universales NL1-GC y LS2. Se unió una pinza GC a un cebador de cada par de cebadores, como se indica. Los amplicones de PCR se separaron en un gel de poliacrilamida al 6% (vol / vol) mediante electroforesis en gel en gradiente desnaturalizante, como se describió anteriormente. Los gradientes de desnaturalización de los geles fueron, de arriba a abajo, del 45% al 60% para los pares de cebadores V3 y de levadura, del 40% al 55% para el par de cebadores LAC y del 45% al 55% para el par de cebadores Bif.
¿Qué cantidad de granos de kéfir de agua necesito para hacer kéfir de agua?
Estos granos se trituraron haciendo rodar una botella de vidrio sobre el exterior de la bolsa, luego de lo cual se agregaron 45 ml de diluyente de máxima recuperación estéril (8,5 g litro-1 de NaCl y 1 g litro-1 de peptona bacteriológica). Esta mezcla se homogeneizó durante 15 min a alta velocidad en un instrumento Stomacher 400. La suspensión de grano de kéfir de agua resultante se utilizó para preparar diluciones decimales apropiadas en solución salina estéril. ¡Aprenda a preparar una bebida probiótica, gaseosa y saludable con esta receta fácil y divertida de kéfir de agua! El kéfir de agua es una bebida probiótica dulce elaborada con granos de kéfir de agua, agua purificada y azúcar orgánica. Los granos de kéfir de agua requieren azúcar y minerales para sobrevivir.
El azúcar moreno tiene algunos minerales de la melaza, pero noté que si no agrego minerales adicionales, con el tiempo comienzan a descomponerse. Agrego un tapón de tónico iónico o unas gotas de minerales traza a mi kéfir de agua para mantenerlo saludable.
- Los recuentos de colonias se expresaron como log UFC por ml de licor de kéfir de agua o por g de granos de kéfir de agua.
- Se ha postulado que los granos de polisacáridos se originan en las hojas de la higuera del cactus Opuntia.
- Los medios de agar MRS, mDMS y YG se incubaron a 30ºC durante 2 a 4 días; Los medios de agar KAA y VRBG se incubaron a 42 ° C durante 24 h.
- Después de 2 a 4 días de incubación anaeróbica a temperatura ambiente, se obtiene una bebida fermentada amarillenta y espumosa que tiene un sabor y aroma afrutado, ácido, ligeramente dulce y ligeramente alcohólico.
Se asumió que las concentraciones de etanol y ácido acético en la matriz de grano de kéfir de agua eran las mismas que las del licor de kéfir de agua. Estos sedimentos se resuspendieron en 2 ml de tampón TES (6,7% [masa / vol] sacarosa, base Tris 50 mM, EDTA 1 mM [Sigma-Aldrich], pH 8,0) y se centrifugaron (21.000 × g, 20 min, 4 ° C ). Los sedimentos resultantes se utilizaron para la extracción de ADN. Por lo tanto, los sedimentos se trataron con 200 U de lyticase (Sigma-Aldrich) en 600 μl de tampón de sorbitol (30 ° C, 60 min), se centrifugaron (21.000 × g, 5 min, 4 ° C) y se procesaron posteriormente como se describe previamente . El ADN obtenido se purificó adicionalmente con un kit de alimentos NucleoSpin (Macherey-Nagel), según las instrucciones del fabricante.
La masa seca de kéfir de agua aumentó inicialmente de 13,8% ± 0,1% (masa / masa) a las 0 horas a 16,7% ± 0,2% (masa / masa) después de 3 h de fermentación. A partir de entonces, la masa seca disminuyó hasta que permaneció estable entre el 13% y el 14% (masa / masa) (Fig. 1A). En cada momento de muestreo, la recuperación de carbono se calculó como la cantidad total de carbono en ese momento de muestreo dividida por la cantidad total de carbono a las 0 h. La cantidad total de carbono recuperado se calculó como la suma de la cantidad de carbono en el licor de kéfir de agua más la de los granos de kéfir de agua más la producida como dióxido de carbono.