Acumulación intracelular de Se determinada por Icp
Además, SeCys2 puede eluir conjuntamente con otras especies de Se no retenidas en algunos procedimientos cromatográficos. La síntesis de carbamidometil-SeCys es, por tanto, un requisito para la identificación de SeCys y la correcta separación de SeCys de otras especies por métodos cromatográficos. En nuestro trabajo, se llevó a cabo plantillas de excel un proceso de carbamidometilación para proteger la estructura de SeCys antes del paso enzimático. Los derivados carbamidometilados se separaron mediante una columna EVO-C18 de fase inversa acoplada a ICP-MS y LC-ESI-MS / MS. El cromatograma obtenido por LC-ICP-MS para el sedimento carbamidometilado y digerido enzimáticamente de F.
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tropaeoli CRL 2034 mostró un solo pico eluyendo en el mismo tiempo de retención que CAM-SeCys. Para identificar este compuesto, se llevó a cabo un enfoque LC-MS / MS; el patrón de fragmentación iónica obtenido correspondió a los fragmentos ionizados de la molécula CAM-SeCys. En este trabajo, se estudió la presencia de dos genes importantes involucrados en el metabolismo de Se mediante reacciones de PCR, es decir, genes que codifican para GR, GshR / gor y para selenocisteína liasa, Scl.
Se detectaron fragmentos de amplificación para GshR / gor en todas las cepas estudiadas. Se detectaron dos bandas diferentes de GshR / gor de 673 y 819 pb para las especies de W. cibaria, que se amplificaron utilizando diferentes cebadores. Los genes Scl que codifican la enzima SCL se detectaron en todas las cepas, excepto en los dos Lactobacillus estudiados, que no fueron amplificados con los cebadores utilizados. En todos los casos, la identidad de los amplicones de PCR obtenidos se confirmó adicionalmente mediante análisis de secuencia.
Sin embargo, la disminución en los hombres fue menos relevante. Estos valores varían según las condiciones de conservación, el pH y la duración del consumo de kéfir. Palomo-Siguero et al. y Pescuma et al. utilizó con éxito una columna Zorbax C8 de fase reversa para la separación correcta de las especies de Se y la identificación adecuada de SeCys2. Sin embargo, uno de los principales problemas relacionados con la identificación del aminoácido SeCys, es su alta inestabilidad después de la extracción, ya que se espera que se oxide para formar enlaces S-Se o Se-Se, puenteando los péptidos que contienen Cys o SeCys.
El kéfir es una mezcla probiótica que se originó en las montañas del Cáucaso de Rusia y que ha demostrado ser beneficiosa en el tratamiento de muchas enfermedades, incluida la diabetes. Por tanto, estudiamos el efecto terapéutico del kéfir en 30 casos de diabetes. Nuestro estudio se centró en el consumo de este producto por diabéticos durante un mes y luego se evaluó su efecto sobre la hemoglobina glucosilada.
Su investigación actual se centra en la producción sostenible y rentable de péptidos bioactivos novedosos para la prevención y el tratamiento de la hipertensión, enfermedades inflamatorias, obesidad y trastornos metabólicos. El Dr. Martinez-Villaluenga ha participado en varios proyectos de investigación nacionales, europeos e industriales con grandes empresas privadas. Martínez-Villaluenga tiene 2 patentes y ha publicado más de 60 artículos y libros revisados por pares en las áreas de Ciencia, Tecnología y Nutrición Molecular de los Alimentos. Ha participado activamente en la tutoría de estudiantes de grado, máster y doctorado y en la docencia en programas de posgrado de la Universidad Autónoma de Madrid. La prueba de hemoglobina HbA1c es una herramienta considerable en el manejo de pacientes diabéticos. Por tanto, se considera que la concentración de HbA1c es el historial de la glucemia durante los 120 días anteriores al análisis de sangre. Este ensayo también demuestra los riesgos de complicaciones a largo plazo.
Los resultados obtenidos muestran que el kéfir actúa sobre la tasa de hemoglobina HbA1c en diabéticos durante y después de tomar un trago de leche fermentada. El valor de la hemoglobina glucosilada durante las dos primeras semanas ha registrado una disminución neta y luego se estabilizó hasta un 5%, lo que corresponde a 1g en los estándares, especialmente entre las mujeres.
- Todas las cepas pudieron crecer en medio MRS o MRSf suplementado con Se, aunque la alteración del crecimiento debido a la presencia de este micronutriente fue dependiente de la cepa.
- Se determinaron la concentración inhibidora mínima y la actividad inhibidora cuantitativa.
- Se estudió la cinética de acidificación de la leche fermentada con kéfir frescos y liofilizados a los 0, 1, 3 y 6 meses de almacenamiento (4 ° C).
- Se tomaron muestras a intervalos de tiempo regulares durante la fermentación y se midió el pH con un instrumento ALTRONIX TPX-IIITM, hasta que el valor fue constante.
- Los granos de kéfir se inocularon en leche entera UHT (10% p / v) y la fermentación se realizó a 30 ° C.
El tamaño de los fragmentos de ADN se estimó utilizando una escalera de ADN estándar de 1 kb y fue preciso con la longitud esperada de los amplicones. Contenido total de Se en sedimentos celulares y sobrenadantes de cepas de LAB seleccionadas cultivadas en MRS y MRSf con selenito de sodio a 30 ° C durante 24 h, según lo revelado por ICP-MS. Las colonias cambiaron de color blanco a rojo después de 24 h de incubación, aumentando la intensidad del color rojizo con el tiempo. Después de 48 h de incubación, no se observó ningún cambio de color adicional. La morfología celular de Lactobacillus brevis CRL 2051, Lb.