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Los sedimentos resultantes se utilizaron para la extracción de ADN. Por lo tanto, los sedimentos se trataron con 200 U de lyticase (Sigma-Aldrich) en 600 μl de tampón de sorbitol (30 ° C, 60 min), se centrifugaron (21.000 × g, 5 min, 4 ° C) y se procesaron posteriormente como se describe previamente . El ADN obtenido se purificó adicionalmente con un kit de alimentos NucleoSpin (Macherey-Nagel), según las instrucciones del fabricante. El ADN purificado se diluyó hasta aproximadamente 50 ng μl − 1 antes de realizar los ensayos de PCR. Para evaluar la diversidad bacteriana, se utilizó el par de cebadores de ARNr 16S universales 357f-GC y 518r.
El kéfir de agua es una excelente fuente alternativa de bacterias probióticas para quienes siguen una dieta sin lácteos, pero no contiene el mismo contenido de proteínas y calcio que proporciona la leche. El kéfir de agua también se conoce como tibicos, cristales de agua japoneses o abejas de California. Se prepara combinando agua filtrada con azúcar y agregando granos de kéfir a la mezcla. Pero, antes de entrar en detalles sobre cómo preparar kéfir de agua en casa, echemos un vistazo a por qué debería prepararlo para el consumo en primer lugar. Parece una limonada, pero un poco menos ácida, el kéfir de agua es una de las bebidas fermentadas que rebosa de varias propiedades promotoras de la salud. La fermentación es el proceso de crecimiento de bacterias saludables en nuestros alimentos.
- Consisten en bacterias lácticas y levaduras que se reproducen y aumentan en número cuando entran en contacto con la solución de agua y azúcar.
- El kéfir de agua es una bebida fermentada tradicional hecha de una solución de agua y azúcar y fruta mezclada con granos de kéfir de agua.
- Estos microorganismos están creando una bebida suave y ligeramente ácida que está llena de probióticos.
- Los granos de kéfir de agua son cristales blanquecinos que visualmente se parecen a la coliflor.
¿Puedo usar agua del grifo para hacer kéfir de agua?
Todos los aislados de agar mDMS recogidos después de 192 h de fermentación se identificaron como Acetobacter lovaniensis / fabarum. El análisis de diversidad de especies de levadura dependiente del cultivo reveló la presencia de dos especies, a saber, Saccharomyces cerevisiae y Dekkera bruxellensis (Fig. 2). Además, la diversidad de especies de levadura en el licor de kéfir de agua y en los granos de kéfir de agua fue similar y se mantuvo estable durante toda la fermentación. Estos sedimentos se resuspendieron en 2 ml de tampón TES (6,7% [masa / vol] sacarosa, base Tris 50 mM, EDTA 1 mM [Sigma-Aldrich], pH 8,0) y se centrifugaron (21.000 × g, 20 min, 4 ° C ).
Reflexiones finales sobre cómo hacer kéfir de agua
para las bacterias del ácido láctico y las levaduras, respectivamente, lo que indica que había de 4 a 10 veces más microorganismos en los granos de kéfir de agua que en el licor de kéfir de agua. Los medios de agar MRS, mDMS y YG se incubaron a 30ºC durante 2 a 4 días; Los medios de agar KAA y VRBG se incubaron a 42 ° C durante 24 h. Los recuentos de colonias se expresaron como log UFC por ml de licor de kéfir de agua o por g de granos de kéfir de agua.
Esta fermentación de kéfir de agua estuvo dominada por la especie bacteriana del ácido láctico Lb. Hubo más bacterias del ácido láctico que levaduras, aunque prevaleció el metabolismo de las levaduras. La mayoría de los microorganismos estaban presentes en los granos de kéfir de agua. La masa de granos de kéfir de agua aumentó mientras la sacarosa estuvo presente, y los principales metabolitos producidos durante la fermentación fueron etanol, dióxido de carbono, ácido láctico, glicerol y ácido acético. El acetato de isoamilo, el hexanoato de etilo, el octanoato de etilo y el decanoato de etilo dominaron el aroma del kéfir de agua del presente estudio. La diversidad de especies bacterianas en el licor de kéfir de agua y en los granos de kéfir de agua fue similar y más o menos constante en función del tiempo de fermentación.
El proceso de fermentación también descompone nuestros alimentos, lo que los hace más fáciles de digerir y los nutrientes están más disponibles para nuestro cuerpo. Además de ser más fáciles de digerir, los alimentos fermentados como el kéfir de coco aportan probióticos a nuestro intestino. Esto ayuda a mejorar nuestra inmunidad al fortalecer y proteger las células inmunitarias en nuestro tracto digestivo. También se ha demostrado que comer alimentos fermentados como compra venta automoviles el kéfir de coco previene y cura la cándida, un crecimiento excesivo de levadura que afecta la salud y puede ser difícil de curar. Al equilibrar nuestras bacterias intestinales, el kéfir ayuda a combatir trastornos digestivos como el SII y la enfermedad de Crohn. En conclusión, durante el presente estudio se obtuvo una fermentación sólida de kéfir de agua con granos de kéfir de agua que creció bien, que se puede utilizar como referencia para otros kefir de agua.
Los amplicones de PCR se separaron en un gel de poliacrilamida al 6% (vol / vol) mediante electroforesis en gel en gradiente desnaturalizante, como se describió anteriormente. Los gradientes de desnaturalización de los geles fueron, de arriba a abajo, del 45% al 60% para los pares de cebadores V3 y de levadura, del 40% al 55% para el par de cebadores LAC y del 45% al 55% para el par de cebadores Bif. El procesamiento en gel y la secuenciación de la banda de ADN se realizaron como se describió anteriormente. La identificación de las secuencias de bandas de ADN se realizó como se describió anteriormente. El análisis de diversidad de especies dependiente del cultivo de bacterias del ácido láctico, bacterias del ácido acético y levaduras en el licor de kéfir de agua y en los granos de kéfir de agua se evaluó después de 0, 24, 48, 72 y 192 h de fermentación. Esto se hizo recogiendo colonias al azar (10% a 20% del recuento total de colonias) de las placas de agar con 30 a 300 colonias.
Los granos de kéfir se colocan en agua azucarada y se produce el mismo proceso de fermentación. La fermentación produce bacterias beneficiosas al tiempo que reduce el contenido de azúcar de la bebida. Es importante tener en cuenta que los granos son diferentes: el kéfir de agua se elabora con granos específicos que dependen del agua y no funcionará de la misma manera si se pone en leche o sucedáneos de la leche. Se puede usar azúcar de caña o jugo de frutas para endulzar el agua.
El par de cebadores específicos de grupo LAC1 y LAC2-GC se usó para bacterias del ácido láctico, y el par de cebadores específicos de género bif164f y bif662r-GC se usó para bifidobacterias. La diversidad de levaduras se evaluó con el par de cebadores eucariotas universales NL1-GC y LS2. Se unió una pinza GC a un cebador de cada par de cebadores, como se indica.